尊龙凯时推出的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,货号为YJ-MSCYD-004,规格有100ml和200ml可供选择,售价为12800元。该试剂盒经过团队的精心优化,旨在提升间充质干细胞向成脂细胞的分化能力。请注意,本产品仅限于科研用途,禁止用于诊断、治疗、临床、家庭及其他非科研用途。
### 产品组成与保存
本试剂盒由多种成分组成,具体如下:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5mL(100mL规格)/ 10mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期1年。
- 诱导分化添加剂Ⅱ:1mL(100mL规格)/ 2mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期1年。
- 优质胎牛血清:10mL(100mL规格)/ 20mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期1年。
- 细胞基础培养基:85mL(100mL规格)/ 170mL(200mL规格),保存于4℃,有效期1年。
- 油红O染色液:5mL(100mL规格)/ 10mL(200mL规格),保存于4℃避光,有效期1年。
注意事项:为确保产品有效性,请避免反复冻融。配制好的诱导培养基需在2-8℃下保存,且有效期为2周,考虑实验需求合理配制。
### 使用说明
#### 1. 配制成脂诱导分化完全培养基
在室温下融化各成分和血清。融化后需瞬时离心,确保溶液集中于离心管底部。若因子或血清中出现沉淀物为正常现象,无需过滤以避免成分损失。按以下比例在无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,推荐每次制备50mL:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5% (25mL)
- 诱导分化添加剂Ⅱ:1% (50μL)
- 优质胎牛血清:10% (5mL)
- 细胞基础培养基:85% (425mL)
#### 2. 诱导分化实验步骤
建议选取第3~5代、纯度达90%以上、状态良好的间充质干细胞,进行消化与离心收集。然后使用含10%FBS的完全培养基调整细胞密度,并均匀铺入培养瓶或培养板中,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。细胞汇合度达到80%~100%时,进行诱导分化。
小心吸弃细胞培养上清,沿孔壁缓慢添加事先配制的诱导分化完全培养基,继续在37℃恒温培养。每2~3天需更换新鲜的培养基,若发现培养基颜色变为澄清的黄色,请及时缩短更换周期。
诱导3周后可进行油红O染色鉴定。
### 油红染色分析
诱导分化结束后,吸弃细胞培养上清并用1×PBS洗涤1~2次。加入适量细胞固定液(例如4%中性甲醛溶液),室温固定30分钟。然后配制油红O工作液,按照3:2的比例混合油红O贮存液与蒸馏水,并使用滤纸过滤。
固定完成后,再次用1×PBS洗涤2次,缓慢加入适量油红O工作液,室温染色30分钟。染色后需吸出染色液,再用PBS洗涤,去除浮色,并用显微镜观察细胞染色效果,细胞内油滴应呈红色。
以上步骤可确保使用尊龙凯时的成脂诱导分化试剂盒时达到最优效果,为您的科研工作提供可靠支持。