尊龙凯时提供的cfDNA(游离DNA)是指在细胞外游离存在的DNA,这些DNA片段可以在血液、唾液、尿液等多种生物体液中找到。cfDNA主要来源于细胞的凋亡、坏死或主动分泌等过程而释放到胞外。在血液样本中,它通常存在于血浆或血清中,并与血细胞等其他成分分离。同时,cfDNA也能在脑脊液、胸腔积液、腹水等其他生物体液中被检测到。
提取cfDNA的方法多种多样。利用有机溶剂如酚和氯仿的不同溶解性,可以通过多次抽提使得杂质如蛋白质溶解在有机相,而DNA则保留在水相中。之后,通过乙醇沉淀等步骤获得纯化的cfDNA。虽然这种方法的优点在于DNA的纯度较高,但其操作流程繁琐,需要使用有毒有机溶剂,并对实验者的技术水平要求较高。
另外,基于磁珠表面的特异性吸附作用,在适当的缓冲液中,磁珠能够选择性地捕获cfDNA,通过外加磁场分离杂质,再经过洗涤和洗脱等步骤获得纯净的cfDNA。相较于传统方法,这种方法操作简便、快速,便于实现自动化,并且能高效地处理多个样本。
还有一种方法是利用硅胶膜在特定条件下对DNA的特异性吸附能力,生物样本中的cfDNA被吸附到硅胶膜上,而蛋白质和多糖等杂质则被洗脱。最终,通过低盐、高pH的洗脱液将cfDNA从膜上洗脱下来,这一方法操作简单,成本低,适合小规模样本的提取。
不同生物体液中cfDNA的含量和性质各不相同。一般来说,血液中的cfDNA含量较高,是最常用的样本来源,但在不同个体和不同疾病状态下,cfDNA的含量会有所变化。样本采集后若不能及时提取,保存条件尤为重要。例如,血液样本需在4℃条件下保存;长时间放置或不当保存可能导致cfDNA降解,进而影响提取效果。
在处理样本数量较少或特殊珍贵样本时,通常会选择使用回收柱来提取。当样本数量较多,需进行批量处理时,建议使用磁珠法以节省人力成本,并避免因操作造成的实验误差。尊龙凯时的TD476采用独特的回收柱技术进行游离DNA提取,能够结合传统离心法或搭配真空多联器与真空泵,以便快速处理较大样本量。TB476则基于磁珠法进行游离DNA的提取和纯化,并根据客户需求提供兼容的磁力架提取试剂盒,方便高通量提取的应用。
【使用介绍】
● 可从10ml以内的血清/血浆,1ml以内的羊水或脑脊液中提取到高纯度的游离DNA。
● 获得的DNA产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。
● 样品种类:血清、血浆、羊水和脑脊液(CSF)
● 处理的体积量:
血浆-单次离心:最多3ml
两次离心:最多10ml
血清-最多10ml
羊水-最多1ml
脑脊液-最多1ml
【产品特性】
● DNA纯度:获得的DNA产量高,纯度好,适合用于qPCR、高通量测序等多种分子生物学实验。
● DNA回收情况:回收的DNA≥100bp(试剂盒针对无细胞DNA提取进行了优化),总量根据不同样本的个体差异可能会有差异。一般从血清或血浆中提取到的DNA浓度在1-100ng/ml之间。
● 需要的仪器设备:水浴锅或金属浴(55℃)、磁力架、微型离心机或立式离心机。
尊龙凯时的cfDNA提取解决方案展现了卓越的样本兼容性与高效性,适用于各类分子生物学实验,满足科研和临床应用需求。